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生化清洗液:电化学发光分轿
日期【2016-09-20 10:16】 共阅:【】次

生化清洗液小编为你介绍一下常见发光免疫分析技术的代表仪器中的电化学发光

电化学发光的原理是对电极施加一定的电压进行电化学反应,反应的产物之间或与体系中某种组分发生化学发光,用普通光学手段测髓发光光谱军Ⅱ强度从丽对物质进行衡量分析的一种方法。与化学发光有所不同,其差异在予氧化反应是通过电极上的电化学反应产生的,而不是氧化剂或发光剂自身内氧化产生,其标记物为三联吡啶钌及其衍生物Ru(bpy)3 2 ,并以三丙胺(TPA)为还原荆。如图1所示,Ru(bpy)32十穰TPA分剃在弼投袅嚣氧化成Ru(bpy)3 3 搬TPA的阳离子自由基IPA ,IPA 迅速脱去一个质子形成TPA自由基,TPA具有强的还原性,从而把Ru(bpy)3 3 还原为激发态的Ru(bpy)3 2 ,后者发射一个620 nm的光子回到基态再参与下一次电化学发光。必需0.01毫秒就可发出稳定的光,每毫秒几十万次的循环电化学发光,大大提高了分析的灵敏度。另外,通过电极反应在线制备了不稳定的发光剂Ru(bpy)32 缈程TPA,避免了直接使用Ru(bpy)3 2 对分析测试的影响。

电纯学发光的主要特点是发光过程中的标记物基本不被消耗,丽反应体系中其他成分充分过量,因此发光倍号强而稳定,且发光时间较长。其缺点为测量方式复杂、仪器成本及维护费用高;同时环境及样品中同类元素也存在较弱的本底干扰。反复使用的流动池可能导致交叉污染;而冲洗或进样中产生的气泡也会干扰测定;同时繁琐冗长的冲洗过程也会成为提高检测效率的瓶颈。另外使用磁性或非磁性微粒时,强烈的散射吸收作用也会降低灵敏度。

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